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Sigma蛋白酶K跟蛋白酶有什么區(qū)別

發(fā)布時(shí)間: 2018-11-26  點(diǎn)擊次數(shù): 3681次
Sigma蛋白酶K是一種枯草蛋白酶類(lèi)的高活性蛋白酶,用于生物樣品中蛋白質(zhì)的一般降解。可以用于消化各種蛋白。用于各種常見(jiàn)的分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等相關(guān)實(shí)驗(yàn),例如基因組DNA抽提、酶的消化去等。
 
Sigma蛋白酶K跟蛋白酶有什么區(qū)別:
蛋白酶K廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué),藥理學(xué)等科研方面.一種非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關(guān)的絲氨酸蛋白酶,具有很高的比活性.一般儲(chǔ)存在-20°C,避光防潮密閉干燥。
蛋白酶是所有能夠催化分解蛋白質(zhì)的酶類(lèi)的統(tǒng)稱(chēng),而蛋白酶K則是特指一種枯草蛋白酶類(lèi)的高活性蛋白酶,用于生物樣品中蛋白質(zhì)的降解,比如在提取DNA時(shí)溶解DNA的水中就有一定量的蛋白酶K.所以它們不屬于同一個(gè)產(chǎn)品
蛋白酶K配制標(biāo)準(zhǔn):20mg/ml蛋白酶K配制標(biāo)準(zhǔn):將200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中,輕輕搖動(dòng),直至蛋白酶K*溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml,然后分裝成小份貯存于-20℃。
 
Sigma蛋白酶K的保存:
保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融,有效保證12月。
孵育溫度為55至65℃,理想孵育溫度為58℃,孵育時(shí)間為15分鐘至48小時(shí);理想孵育時(shí)間為2小時(shí)。
 
Sigma蛋白酶K作用:
蛋白酶K在原位雜交技術(shù)中通常用于雜交前的處理,它具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用,以增加探針與靶核酸結(jié)合的機(jī)會(huì),提高雜交信號(hào).但蛋白酶K的濃度過(guò)高、消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或孵育溫度過(guò)高時(shí),都會(huì)對(duì)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)有一定的破壞,導(dǎo)致組織切片的脫落,細(xì)胞核的消失,從而影響雜交結(jié)果。
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